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猪体细胞克隆技术平台

1、细胞培养

细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养被广泛地应用于生物科学地诸多领域:细胞融合、组织工程、胚胎工程、干细胞工程、动物体细胞克隆等。供体细胞培养对于体细胞克隆来说是一个关键环节,供体细胞的选择直接决定了克隆后代的所有基因组成,供体核来源很广泛且种类繁多,大部分是胚胎细胞、分化程度较低的胎儿细胞和高度分化的成年动物体细胞。通过体外细胞培养获得丰富的基因库,结合体细胞克隆技术为动物种保护、育种改良、培育新种质、医学领域的研究与应用提供有效方案。

2、精液冻存

精液冷冻技术是在液氮或干冰等冷源的作用下,通过程序降温处理,使精子在超低温的环境中冷冻保存,在人工授精时将其解冻,使其活性恢复后再进行输精。通过精液冷冻的方式可以保存少数优良种公猪的高质量精子,充分发挥优良种公猪的遗传潜力加快畜群品种改良。冻精还具有保存时间长,不易交叉感染,不受地域限制,能够短时间内大量扩群等优势,在畜牧业中具有重要作用。

3、胚胎移植

胚胎移植是把体内或体外获得的受精卵或早期胚胎移植到受体母猪的输卵管或子宫内,使其继续发育为个体。

4、体外受精

体外受精(In Vitro Fertilization,IVF)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。它的基本原理是在人工模拟体内环境,包括营养、温度、湿度、气体、渗透压、pH等,使卵丘卵母细胞复合体中的初级卵母细胞成熟,同时使精子获能,完成受精。

IVF技术结合精子冷冻技术,可用于远距离的运输,及品种交流;结合性别控制与胚胎移植,可有效提高优良品种资源利用,增加选育强度,缩短遗传育种进程,提高动物生产的经济价值。

5、单精注射

单精注射(Intracytoplasmic Sperm InjectionICSI)技术是在显微操作仪下,将整个精子或精子的头部注射到卵母细胞胞质内,完成受精。

ICSI技术可有目标性选取形态较好的精子,进行注射,可以进一步提高体外受精的成功率,在精子活力不高及精子数量不足时,采用ICSI技术可有效避免由透明带或卵质膜所形成的受精障碍,使受精率和准确率大大提高,为优良品种保驾护航。

6、显微注射

  • 什么是显微注射技术?

  显微注射技术是利用显微操作系统将重组过的DNA注入到受精卵的原核中,再通过胚胎移植技术将整合有重组基因的受精卵移植到受体动物的子宫内发育,从而获得重组DNA的动物个体。

  • 显微注射技术优势:

  任何DNA在原则上均可传入任何种类的细胞内,已成功运用于包括小鼠、鱼、大鼠、兔子及许多大型家畜,如牛、羊、猪等基因转殖动物。可以注射进细胞的物质包括有:各种细胞器、激酶、组织化学标志物(比如辣根过氧化物酶或者荧光黄)、蛋白质、代谢物质、微磁头、离子、抗体、基因、分子生物学的mRNADNA等等。

7、基因编辑

基因编辑技术是对生物体内源基因进行精确靶向修饰的技术,极大地推动了生命科学的发展进程。将基因编辑技术与体细胞克隆技术相结合可培育高生产性能新品种克隆猪。并且猪具有人接近的亲缘关系、解剖结构和生理特性,基因编辑猪可以提供与人体更为匹配的异种移植器官,能够构建适当的疾病动物模型,用于新的药物和治疗手段的开发。

8、干细胞治疗

细胞治疗在肌腱损伤、退行性关节疾病、癌症或肿瘤、糖尿病、免疫系统疾病等疾病治疗方面具有广阔的研究应用前景。MSCs是能分化成骨、脂肪和软骨细胞的基质细胞。可以从脂肪、骨髓和脐带等分离MSCs并进行回输,使细胞特异性归巢于病损部位,直接或间接参与病损组织或器官的再生和修复。

9、体细胞克隆

  • 什么是体细胞克隆?

  体细胞克隆技术,是继猪人工授精技术、体外受精技术(试管猪技术)、性别控制技术等之后的一种新型的辅助生殖技术。简单来讲,就是复制,克隆技术就如同复印机复制纸张一样,不会对猪的外貌、生产性能等造成任何的改变。

  • 体细胞克隆技术与其他辅助生殖技术有何区别?

    人工授精:有性繁殖,含有父母系双方的基因;

    体外授精:有性繁殖,含有父母系双方的基因;

    体细胞克隆:无性繁殖,与被克隆新个体的基因完全相同。

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